***防病技水
***预防就是利用人工***方法增强生物体的自身***能力以到预防疾病发生的目的。人工***是将人工制成的生物制品(如疫苗、菌苗、类毒素或细胞***制剂等)接种到鱼体,使鱼体自身产生对相应疾病的防御能力。水产上使用的生物制品主要为疫苗。
疫苗按其性质与成分分为单价苗、多价苗和联苗;按针对病原种类分为病毒疫苗、菌苗、寄生虫苗。根据制备方法可分为活疫苗、灭活疫苗、代谢产物和亚单位疫苗及生物技术苗。其中生物技术疫苗包括基因工程亚单位疫苗、合成肽疫苗、抗独特型抗体疫苗、基因工程活载体疫苗及DNA疫苗。
一、病毒病***防病技术 1.草鱼病疫苗
草鱼病是由草鱼病病毒(grass carp hemorrhage vi- rus,GCV)引起的、严重危害草鱼养殖的传染性疫病。
(1)常用疫苗种类 我国在草鱼病方面的鱼苗主要有以下三类。
①组织疫苗 在草鱼病病原体尚未有明确定论时,养殖生产上已开始使用组织疫苗防控草鱼病,制备方法如下∶取典型患病症状的鱼体肝、脾、肾和肌肉组织,无菌生理盐水冲洗后,加入生理盐水或磷酸缓冲液(PBS)制成1∶10匀浆液,离心取上清液,分别加入800单位/毫升青霉素和800微克/毫升链霉素及0.1%福尔马林,56℃灭活2小时或32℃灭活72小时,4~8℃可保存半年以上。使用方法∶肌内或腹腔注射,***保护率可达 70%以上。
组织疫苗的制备技术和工艺比较简单,对设备要求不高,极易被各级水产技术单位掌握,因此推广和应用迅速。而且组织疫苗价格低廉、效果较好,受到广大养殖者的喜爱,尤其与肠炎病、烂鳃病和草鱼赤皮病一起制备的组织疫苗实际上成为了一种多联疫苗,在生产中表现出稳定的防控效果。
②细胞疫苗通过把病毒接种到细胞中,病毒繁殖出现病变后收获病毒再灭活制成的疫苗。我国已建立了ZC-7901、CIK、 PSF 等草鱼敏感细胞株,并掌握了其工厂化培养技术,为草鱼病细胞疫苗提供了强大的基础。草鱼病病毒大规模培养方法主要有两种∶一种是采用微载体大规模培养细胞,即将细胞吸附在 GT-2微载体上,再将微载体悬浮培养,单位体积培养液的细胞培
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效率比静置培养高 20~25倍,病毒滴度可提高45倍左右,但用于微载体细胞培养的生物反应器需要有全面的培养参数、气体控制设施,价格较为昂贵;另一种是采用旋转管进行细胞培养,WC21- 891旋转培养机可容纳3000毫升的血清瓶21个,单位培养液的细胞产量比静置培养高3.5~5倍,该装置及相应培养室要求较之生物反应器低廉,比较适合一般的实验室进行疫苗制备。
③弱毒活疫苗制备方法∶将病毒株接种于PSF细胞,于培养液中加人1∶1000浓度病毒液,29代后获得性状稳定的减毒株GCHV-892株,去除培养液,其减毒效果保持稳定不变。减毒株对草鱼没有致病力,但有较好的***原性。目前,弱毒活疫苗已在广东、广西、福建、海南、湖北、湖南、四川、浙江、江苏等多个地区进行了区域性试验,***保护***达***。